上皮向间充质转变是一些癌细胞从上皮表型转化为间充质细胞的主要过程，已被证明可促进癌症患者的化学耐药性和/或转移。
近期，日本的一研究团队鉴定出了 CD45/CD326 双阳性癌细胞，发现其表面标记物可以阐明非小细胞肺癌（NSCLC）细胞的表型异质性，并确定出一个新的亚群，该亚群对 NSCLC 患者和恶性胸腔积液患者的上皮和非上皮细胞表面标记物呈双重阳性。
（图源:Clinical Cancer Research官网截图）
非小细胞肺癌（NSCLC）约占肺癌的 80%，许多研究表明癌细胞具有异质性。癌症患者的恶性积液被认为是不良的预后征兆，肿瘤异质性也是患者预后的重要临床指标。
例如，胃癌患者腹水中较高的肿瘤细胞比例可导致患者预后较差，且已知癌症中的上皮-间质转化（EMT）与治疗耐药性、侵袭性和转移有关。
研究详情
研究人员们在 年至 年之间收集了 39 例 NSCLC 患者的样品，其中 21 例为切下来 2-3 小时内收集的新鲜肺癌的肿瘤组织，18 例为恶性胸腔积液样品，这些样本中存在不同百分比的 CD45 pos/CD326 pos 细胞。
通过 FACS 确认 CD45 pos/CD326 pos 双阳性癌细胞
研究人员们通过 FACS 检测到样品中 CD45 pos/CD326 pos 单细胞的比例很大，因此猜测这些单细胞是 EMT 的最可能的候选者，最终在实体癌组织和恶性胸腔积液中均检测到了，并且发现 CD45 pos/CD326 pos 细胞是 CD45/CD326 双阳性恶性细胞。
将健康的中年男性志愿者中提取的血清样本用作对照，在其中未检测到 CD45 / CD326 DPC。在实体瘤中，CD45 / CD326 DPC 群体的平均大小为 5.5%（0.4%–17.9%），而在恶性胸腔积液中，CD45 / CD326 DPC 人群的平均大小则高出近 7 倍，为 34.5%（1.1%–96.7%）。同时，通过荧光显微镜和巴氏染色确认 CD45 / CD326 双阳性癌细胞。
CD45/CD326 DPC 中 EGFR 基因突变的确认
研究人员们将 EGFR 突变用作癌细胞评估的标志物，并监测了其在每个分析样品中的存在，发现 CD45 pos/CD326 pos 细胞和 CD45 neg/CD326 pos（仅上皮细胞单个阳性）细胞具有与每个相应原发肿瘤相同的突变，这些表明双阳性细胞起源于癌细胞。
在所有 18 例胸腔积液患者中分析了 EGFR 基因的突变，有 5 个具有致病突变，所有突变均位于第 19 外显子或第 20 外显子，并将其中 3 例用 PCR 扩增了靶突变区域，从遗传学角度确认 CD45 / CD326 DPC 是恶性的。
来自 CD45 pos/CD326 pos 的每个样品（双阳性）细胞在其相应患者中显示出相同的突变。研究人员们还进行了核苷酸测序分析，CD326 pos 组 9 个碱基插入其中，而 CD326 neg 组没有这种突变。
CD45 pos/CD326 pos 表达与患者生存不良相关
研究人员探究 18 例胸腔积液患者中 CD45 pos/ CD326 pos 细胞对患者预后的影响，分析了 CD326 pos 细胞群中 CD45 pos/CD326 pos 细胞的比例，发现患者的 CD45 pos /CD326 pos 细胞比例较低有较好的预后。
在该队列研究中，有 2 名患者的 CD45 pos/ CD326 pos 细胞超过 90%，18 名患者中有 4 名（22%）仍然活着，这 4 名幸存者中有 3 名患有 EGFR 突变并正在用酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗；剩余的幸存者正在接受 PD-1 治疗。
小结
1. 首次证明 NSCLC 患者的实体肺肿瘤组织和胸腔积液中都存在 CD45/CD326 双阳性癌细胞。
2. 将 EGFR 突变用作癌细胞评估的标志物，证实双阳性细胞起源于癌细胞，且发现患者组织内的肿瘤内异质性。
3.NSCLC 患者的原发肿瘤和恶性胸腔积液中 CD45/CD326 DPC 的浓度范围很广，高百分比的 CD45 / CD326 DPC 是重要的不良预后因素。
4. 目前通过液体活检检测 CD45/CD326 DPC 在技术上并不容易，使用非癌性样本（例如来自非恶性疾病患者的胸腔积液）作为对照的其他研究可以为将来的研究提供有价值的信息。
5. 原发性实体瘤组织和胸腔积液，但这些患者的转移性肿瘤组织和血清尚不可用，有必要使用转移灶和/或患者血清中的细胞进行进一步研究，以验证关于 CD45/CD326 DPC 对转移的贡献的假设。
