一、实验材料
NCI-H1299,购自上海晶莱生物技术有限公司。
表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家(货号)
细胞培养瓶FALCON 中国(353014)
Penicillin/streptomycin solution(KGY002)
0.25% Tripsin-EDTA(BK-E3076)
PBS(BK330-2)
胎牛血清GIBCO 美国(10270-106)
1640 培养基Hyclone 美国(SH3080901)
Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒
二、实验仪器
表 2.2.1 主要仪器仪器厂家(型号)
超净工作台(SW-CJ-1FD),中国
CO2 培养箱SANYO(XD-101),日本
生物倒置显微镜OLYMPUS(IX51),德国
台式低速离心机(80-2),中国
振荡器(WH-2),中国
立式压力锅(YXQ-LS-50),中国
电热鼓风干燥箱(101AS-3),中国
流式细胞仪BD 公司,型号 C6
三、实验方法
细胞培养
NCI-H1299 细胞培养于含 10% 胎牛血清、100 U/mL 青霉素、100 U/mL 链霉素的 1640 培养基中,在恒温培养箱中以 5%CO2、37 ℃ 以及饱和湿度条件下松盖培养,每 2~3 d 换液一次,当细胞长至 80% 铺满时再消化传代。
实验分组H1299 细胞-Con 组
lv-shCON 转染的 H1299 细胞
lv-shIFITM3 转染的 H1299 细胞
Annexin V-FITC/