体会是指将学习的东西运用到实践中去，通过实践反思学习内容并记录下来的文字，近似于经验总结。那么我们写心得体会要注意的内容有什么呢？下面我给大家整理了一些心得体会范文，希望能够帮助到大家。
对于临床医学实习出科心得体会如何写一
现将本人这一年来的思想、工作、学习情况作简要总结：
一、思想上，自觉加强理论学习，努力提高政治思想素质。
首先，我主动加强政治学习，除了经常看电视、看报纸、关心时事政治外，我还认真学习了马列主义，毛泽东思想，邓小平理论，“xxxx”重要思想，自觉树立高尚的世界观、人生观，树立社会社会主义荣辱观，用先进的思想武装自己;其次理论学习还要在行动上落实，注重其对实践的指导意义，自觉地践行“xxxx”，时刻用其来约束自身行为，改正不良习惯，继续发扬优秀传统。
另外，除了干好自己的本职工作外，积极参加与配合医院组织的各项活动，维护领导、团结同志，工作任劳任怨、积极主动，取得了同事们的一致好评与认可。通过努力，我感到自己的政治素质有了长足进步。
二、在业务上，努力夯实专业基础，扩大知识面，力求更好的完成自己的本职工作。
作为一名刚刚毕业的大学生，虽然有五年的专业知识学习，但是实践的东西接触的少，对许多现场问题不了解。面对这种情况，依靠自己认真的学习，促成自身知识结构的完善和知识体系的健全，让自己尽早、尽快的熟悉工作情况，少走弯路。在接触到新的陌生的领域时，缺少经验，对于业务知识需要一个重新洗牌的过程，自己在领导、同事的帮助下，能够很快融入到工作中。
在日常生活中 我认真服从领导安排，遵守各项规章制度和各项要求，养成良好的工作作风。 在内科实践工作中，我深切体会到作为内科临床医生的应具备的素质和条件，在上级医师的指导下，我逐渐对内科常见并多发病的诊断、治疗有了较多的认识，作为住院医师对病人从入院-住院-诊断-治疗及出院-复查有了很好的掌握，经过不断的学习和训练，我已能熟练掌握本科室常见并多发病的诊疗方法。
内科工作是复杂多样的，在工作中也产生了一些经验教训，如对于一些不常见的病状缺少认识，这些经历教训我视为宝贵的经验，更对自己以后的诊治水平有了清醒的认识，提出了更多的要求，在以后的工作中要更细心全面询问查体，积极学习先进的临床知识，争取早日成为病人心目中满意放心的医师。
三、学习生活上，完成了学生角色的转变，完全进入工作状态，努力开展工作。
由于进入了一个完全陌生的工作环境和生活状态，曾经很担心不知该怎么与人共处，该如何做好工作。但是医院里宽松融洽的工作氛围、良好的医疗环境及学习发展机遇以及在各级领导、同事的关心和帮助下，让我很快完成了从医学生到医生的转变。
工作中能够始终保持一种积极向上的心态，努力开展工作。通过近一年的体验已经逐渐适应了这边的工作状况，对于领导们的关心和关怀，我感到了很大的动力和压力，争取在以后的工作生活中以更加努力的优秀成绩来回报。不仅能够弥补自己耽误的工作学习而且能够有所成就，不辜负领导们的期望。
过去的一年，是不断学习、不断充实的一年，是积极探索、逐步成长的一年。我也深知，在业务知识上，与自己本职工作要求还存在有一定的差距。在今后的工作和学习中，自己要更进一步严格要求自己，加强思想政治、业务知识方面的学习，认真总结经验教训，克服不足，在各级领导和同事的帮助下，通过不懈地努力，加强我的自身能力。更好的为人民服务。
对于临床医学实习出科心得体会如何写二
尊敬的领导：
您好!
感谢您在百忙之中阅读我的自荐信!我叫xx，xx医学院临床医学创伤外科专业20xx届本科毕业生。
我校自建校以来，一直保持着治学严谨的优良传统。在这样一个学术气氛，创新精神较为浓重的环境中，在老师们的严格要求及个人的努力下，经过四年专业课程的学习和一年的临床实践，已具备了较为扎实的专业基础知识和临床经验，整体素质有了较大的提高。培养了敏锐的观察力、正确的判断力、独立完成工作的能力和严谨、踏实的工作态度，并以细心、爱心、耐心、责任心对待患者。我是个平凡的男孩，但不甘于平庸，我乐观、自信、上进心强、爱好广泛、能够很好地处理人际关系，有协调沟通方面的特长，并且有很强的责任心与使命感，现在，即将毕业，面对新的人生选择和挑战，我信心十足。
从大一开始，我就特别注重在认真学习好专业课的同时，努力培养素质和提高能力，充分利用课余时间，拓宽知识视野，完善知识结构。在竞争日益激烈的今天，我坚信只有多层次，全方位发展，并熟练掌握专业知识的人才，才符合社会发展的需要和用人单位的需求，才能立于不败之地。
通过努力的学习我多次获得了奖学金及三好学生，在学习的同时，我积极参加院校组织的各项活动，是班上的篮球队队长，在校英语作文比赛中获得xx奖。在五年的学习和生活中，我锐意进取、乐于助人的作风和表现赢得了领导、老师和同学们的信任和赞誉。并在医院实习期间获得患者及家属的高度好评。看到自己所付出的辛苦与汗水换来患者的康复与微笑，这是对我最好的奖励。
尽管有众多应聘者，但我仍然很自信。“怀赤诚以待明主，持经论以待明君”。我不乞求信任，只愿用行动来谋求信任。愿贵院能给我一次尝试工作的机会，施展自己潜能的空间。我会尽心尽责，尽我所能，让贵医院满意，让患者满意，最后愿贵院的事业蒸蒸日上.
此致
敬礼!
自荐人：xxx
xxxx年xx月xx日
对于临床医学实习出科心得体会如何写三
(包括研究意义、国内外研究现状分析，并附主要参考文献及出处)
对基础研究，着重结合国际科学发展趋势，论述本课题的科学意义;
对应用基础研究，着重结合学科前沿、围绕国民经济和社会发展中的重要科技问题，论述其应用情景。
新生儿坏死性小肠结肠炎(nec)是新生儿时期严重威胁生命的消化系统急症，以早产儿、小于胎龄儿发病者较多，在nicu患儿中的发病率高达10%，是早产儿死亡的重要原因之一。临床以腹胀、腹泻、黏液血便和胆汁样呕吐为主要表现，腹部x线平片以肠壁囊样积气为特征，肠道病变范围可局限或广泛，回肠累及最多，黏膜呈凝固性坏死，粘膜下层弥漫性出血或坏死，严重者肠壁全层坏死甚至穿孔。
目前有很多方法用于诊断nec。除了可以根据临床表现诊断外，腹部x线片是最常用的辅助检查方法，虽然其用于诊断nec的特异度较高，但对于早期诊断nec帮助不大，目前也有很多关于il-8、il-10、il-1受体拮抗剂等生化指标用于诊断nec的研究，但缺乏较好的用于早期诊断nec的血生化指标。
tlr是由nomuria等在哺乳动物体内发现与果蝇toll蛋白相似的一种蛋白。tlr在不同细胞的表达和识别不同细胞因子在多种疾病的发病机制中起重要作用，目前研究发现tlr参与肿瘤、肠道免疫性疾病等多种疾病的发病。在人类体内发现的tlr家族共有10个成员，其中tlr4是近年来研究较多的其中一个，tlr4主要表达在内皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞及dc上。
i-fabp是由小肠单层柱状上皮细胞分泌的一种小分子蛋白质，占成熟的细胞基质蛋白的2%。肠缺血早期仅有黏膜受累时即可因为细胞通透性升高而导致ifabp释放入血，具有较好的器官特异性。
本研究旨在通过检测nec患儿血清中的tlr4及肠型脂肪酸结合蛋白，监测其在nec中的动态变化，作为nec严重程度的生化指标，可为辅助诊断nec提供依据，达到早期干预的目的。
tlr4上调导致nec发生的机制研究
)、与lps结合后，被激活的tlr4可以通过髓样分化因子88(myd88)依赖性和非依赖性两个途径介导炎症因子的释放。其中myd88依赖性途径主要介导nf-kb活化和细胞因子产生，而myd88的非依赖性途径主要诱导lps的干扰素(ifn)，以及干扰素诱导蛋白10(ip10)基因、糖皮质激素衰减反应基因16(garg-16)、干扰素调节基因1(irg-1)的表达和dc的成熟，激活下游nf-kb、c-jun氨基末端激酶(jnk)和促分裂原活化蛋白激酶(mapk)p38信号通路，诱导促炎症因子如白细胞介素-1(il-1)6、12和肿瘤坏死因子-α(tnf-α)等的表达。
)、chan等研究发现，tlr4激活后能影响肠道粘膜的修复能力，此与其减少肠道细胞增殖、降低内皮细胞基底部粘附力及减少内皮细胞移动到受损位置的数量有关。sodhi等研究证明，tlr4通过抑制细胞的增殖分化作用于wnt-β-5信号系统，使肠道粘膜修复能力受损，加重nec的病理变化。
)、最新研究表明，tlr4不仅可以与lps结合诱导炎症反应、损伤肠道粘膜导致nec发生，许多分子蛋白如纤维结合蛋白、透明质酸。硫酸肝素等均能激活tlr4，在无外来病原菌时tlr4表达可能增高，释放大量炎症因子从而发生nec的炎症瀑布链式反应。这一发现，可以解释一些无明显感染因素引起的nec。
血小板活化因子(paf)在nec的发生中起重要作用。有研究应用缺氧、低温、人工喂养、细菌感染等方法制成了nec的动物模型，结果发现肠上皮的paf及其受体的表达增高，阻断paf的受体表达后nec的发生率明显下降。paf表达增高可使肠壁血管通透性增高、白细胞游出、细胞粘附分子的合成增多及活性氧生成增加，从而损伤肠壁。有研究表明，paf可活化肠上皮细胞的stat，使磷酯酶a2及内皮素一1的合成增加，并可通过上bax的表达而诱导肠上皮细胞凋亡，从而损伤肠上皮细胞、破坏细胞问的连接而引起细菌移位。另外，paf还可诱导肠上皮细胞产生tlr4，后者可活化ikk，从而激活nfxb而引起炎症级联反应。如果敲除tlr4，则nec的发生率明显降低，说明tlr4在nec的发生中也有重要作用。
沈涤华等研究表明i fabp可以作为早期肠缺血较理想的生物学指标，国外学者研究发现nec患儿血清i-fabp水平明显升高，且与nce严重程度有关。
thuijls等研究发现重症nec患儿在早期血i-fabp水平即明显升高。当临床出
现轻度腹胀，大便隐血阳性怀疑nec时，血、尿i fabp水平在发展成为重症nec的患儿
会明显高于诊断为其他疾病和病情稳定在neci期或ⅱ期的患儿。
对于临床医学实习出科心得体会如何写四
尊敬的院领导：
您好!
当您亲手打开这份求职信，将是对我过去三年的检阅，当您最终合上它，也许又将决定我人生新的旅程。感谢您在百忙中抽空翻阅我的自荐信，自信的我不会让您失望。
我叫xxx，是上海交通大学医学院xx届护理专业的毕业生,借此择业之迹，怀着一颗赤诚的心和对事业的执着追求，真诚地做一翻自我介绍，推荐自己。
我来自福建一个古朴的乡村，纯朴的乡情给了我强健的体魄，严格的家教铸就出我的吃苦耐劳与坚毅不拔的精神。多年来所受的教育与锻炼也使我能够适应这个飞速发展的社会，而且通过两年的大学学习和一年的医院临床实践，已使我具备了较为扎实的专业基础知识，在校期间参加“上海市护理实训中心”的工作及校志愿者活动，培养了我良好的的工作态度和团队意识及较强的独立工作能力和合理调配时间的能力。
作为医学生，我在思想上积极要求进步，乐观向上，不畏难繁，有信心、有责任感，工作态度严谨，希望在未来的日子可以尽自己最大的努力作到更好。
在临床实习中，我把理论知识运用于实际工作中，既巩固了理论知识又加强了基本技能，并积累了临床经验，整体素质有了较大的提高。通过实习培养了我敏锐的观察力、正确的判断力、独立完成工作的能力;严谨、踏实的工作态度并以细心、爱心、耐心、责任心对待每一位患者，能够适应整体护理和人性化服务的发展需要，因此我对自己的未来充满信心!
对于实际工作，我相信我能够很快适应工作环境，并且在实际工作中不断学习，不断完善自己，做好本职工作，我一定会踏踏实实的做好每一份工作。
当然，我还有很多不足的地方，如实践经验不足、社会阅历较浅，但我仍然很有自信，时间是锻炼人与检验人最好的武器。我不乞求信任，只愿有行动来谋求信任。愿贵医院给我一次尝试工作的机会，施展自己潜能的空间，我会尽心尽责，尽我所能，让贵医院满意，让患者满意。
最后祝贵院事业蒸蒸日上!随信附上个人简历，再次感谢您的审阅!
对于临床医学实习出科心得体会如何写五
尊敬各位医院领导:
您好!感激您阅读我的护士自荐信!
我是柳州医学高等专科学校应届毕业生.在校期间，本人学习勤奋刻苦，目标明确，经过在广东省第二人民医院临床实习，现已具备扎实的基础医学、护理学基础的理论知识、护理操作等技能，已初步具备从事临床护理的工作本事。
专业学习之余，本人也善于把握每个实践锻炼的机会，在校期间，曾多次代表学校去参加柳州的个大高校的乒乓球比赛，并取得优异的成绩，这期间锻炼自我的组织和团队合作本事;这些经验将成为我以后工作生活中不可或缺的一份宝贵财富。课外还喜欢看书、上网、尤其热爱运动。经过实践进一步提高了我的组织、领导和人际交往的本事，不断地完善自我。期望您能给我一个表现自我的机会，您就会发现我的与众不一样!
经过在学校和临床的学习.如今的我，应对学习，我自书、沉着、稳重;应对工作，我能干、肯干、敢干;应对生活，我热情、大方、诚恳，此刻毛遂自荐，期盼能加盟贵医院，获得一个让我发挥白衣天使才能的机会!
1.具备扎实的基础医学、临床医学、护理学基础知识;
2.掌握内科、外科、妇科、儿科等专科的护理理论及操作;
3.具备较强的护理技术操作本事;
4.具备较强的语言、文字表达本事;
5.拥有独立的分析问题、解决问题的本事
此致
敬礼!
自荐人：
日期：
对于临床医学实习出科心得体会如何写六
尊敬的医院领导：
您好！
感谢您百忙中垂阅我的自荐书，我叫xx，是xx大学临床医学专业即将毕业的本科生。
四年的医学理论学习形成了我严谨的学习态度、严密的思维方式，良好的学习习惯。一年的临床实习经历更提高了我分析问题解决问题的能力。特别是在实习过程中老师们给我提供了许多动手实践机会，使我对临床各科室的常见病能够做出正确的出国留学诊断和适当的处理。强烈的责任感、浓厚的学习兴趣，动手能力强、接受能力快，并且能够出色的完成各项工作任务，使我赢得了上级医师的一致好评，增加我成为一名优秀医生的信心。
在校期间，丰富的校园工作经验不仅开阔了我的视野，更形成了我沉稳果断、热忱高效的工作作风。本人与其他学生骨干成功地组织了各种校园活动，工作得到同学的认可与老师的好评，本人也多次因为工作出色而赢得多项荣誉称号。这些工作经历，使我具备了一定的组织协调能力、处理应对各种问题的能力，这些能力在工作中是不可或缺的。
作为一名医学生，我热爱我的专业，并为其投入了巨大的精力和热情，圆满完成了所有课程的学习，并取得了良好的成绩，同时我也努力学习英语等课程，英语水平熟练，具备一定的听说读写能力，我深知现代社会更需要“专业突出，素质全面”的人才，我积极参加社会活动，把握住每一个可以锻炼自己的机会。在大学几年里，我参加过很多活动，如校运会、社会实践、校园文化艺术节大合唱及书法比赛等，为班级和年级取得了好的成绩，并做了大量的工作，曾担任过宣传委员、生活委员等职务，并主动组织过一些有意义的活动，如各种体育比赛。
通过大学的学习和实践，我从心理和能力等方面做好了走上临床工作岗位的充分准备。在众多应聘者中，我不一定是最优秀的。但我仍然很有自信。“怀赤诚以待明主，持经论以待明君”。我真诚地希望能成为贵院医疗科研队伍中的一员，我将以高尚的医德、热情的服务，倾我所能，不断学习，为贵院发展事业贡献一份力量，实现“救死扶伤、恪尽职守、一生济事”的夙愿。最后，祝贵单位纳得良才，业绩蒸蒸日上！
此致敬礼！
自荐人：xxx
xxxx年x月xx日
对于临床医学实习出科心得体会如何写七
自踏上工作岗位，转眼间，我已在这片圣洁的土地上走过了四年，如今我是一名妇产科住院医师，我非常热爱自己的岗位。在过去的四年中，因为身体的特殊原因，在生育宝宝过程中，或多或少耽误了很多宝贵的工作时间，也失去了很多宝贵的锻炼机会。现在，我已结束了这一特殊时期，再次斗志昂扬的站在了自己的工作岗位上。
一、加强业务理论学习
为了弥补两年来落下的功课，必须付出更多的努力。而且医学是一门不断创新，不断发展的学科，面对新知识，新技术的不断涌现，作为一名妇产科住院医师，为了努力提高自身的业务水平必须不断加强业务理论学习，制定严密的学习计划是必不可少的，医院为我们提供了通过网络和电子书刊了解最新的医学动态的学习的平台，参加继续教育学习，可以及时为自己充电。通过阅读大量业务杂志及书刊，学习有关医疗卫生知识，写下读书笔记，既丰富了自己的理论知识，也是自己工作学习的经验总结，积累大量的知识瑰宝。
平时也经常参加各类学习活动，积极参加院科组织的学术讲座和疑难病历讨论，经常复习所学的知识，做到温故而知新，及时将所学知识应用到临床，从而极大地开阔了视野，很好地拓展了知识面。在我院争创三级医院的进程中，我明显感觉到了一位纯西医的本科生，要想在今后的工作中有出色的表现，必须从现在起投入到中医的学习中去，只有掌握了中医的辨病辨质，结合于西医的诊疗方法，才能成为一名今后被病人接受的中医院医生。所以一是自我学习，二是抓住“西学中”研究生学习机会，不断提升自己，完善自己。
二、临床工作以患者为中心
在临床工作中，我严格要求自己，坚持以服务患者为中心，遵守各项纪律，兢兢业业，任劳任怨。在妇科门诊，每天的就诊人数都非常之多，我主动放弃每天一小时哺乳时间，认真接诊每一位患者，仔细分析患者的病情变化，虚心向上级医师请教，及时总结经验和教训，顺利完成了五个月的妇科门诊工作。在人流室和治疗室，同样想病人所想，急病人所急，特别是在中午下班时，面对病人焦急的眼神，宁可少休息几分钟，也要给她们做完检查治疗。
现在，我在产科工作，对于经历过孕妇、产妇这一角色的我来说，现在的我，更能设身处地的为每一位孕妇产妇考虑，做好自己本职工作之外，去给于她们更多一份关心和照顾。作为一名妇产科医师，经常会遇到一些病情复杂和急诊的患者，如果不能仔细的分析和没有高度的警惕心和责任感，很有可能漏诊和误诊，造成难以想象的后果。
通过诊治一些疑难危重病人，一方面丰富了我的临床经验，提高了应对疑难危重患者的处理能力，另一方面也提高了疑难危重患者的抢救成功率和确诊率。通过不断的学习和临床经验积累，已能熟练掌握妇产科常见病、多发病诊治技术，能熟练诊断处理一些常见病、多发病。同时，工作中严格执行各种工作制度、诊疗常规和操作规程，一丝不苟接待并认真负责地处理每一位病人，在程度上避免了误诊误治。
三、医疗工作的规范
现在社会，是个法制年代，必须严格按规章制度办事，处处以“法”来约束自己。随着人们对健康期望值的提高和法律意识的增强，医疗纠纷在各级医院已比较常见。今年以来，院部及医务科多次组织学习了相关法律法规，目的是为了规范我们的医疗工作，提高自我保护意识，减少不必要的纠纷。静下心来仔细分析，大部分纠纷的起因还是我们医务人员工作做得不到位，与患者沟通不完善所致。
这一年来，我严格按照院科两级的各种规章制度办事，处处以卫生法规来规范自己的医疗活动。在平时的工作中，积极与患者沟通和交流，及时处理出现的问题和潜在的风险。严格执行病情告知义务，及时规范完成各种医疗文书，有效地将各种可能出现的问题消灭在萌芽状态。
回首全年，总的感觉是忙与累，但我觉得很充实。一年的工作学习，使自己成长了不少，今后的路需要自己一步一脚印坚实的走下去，我将严格要求自己，做好自己。
对于临床医学实习出科心得体会如何写八
尊敬的贵医院领导：
您好!
首先真诚地感谢你能在百忙之中审阅我的求职函，这对一个即将迈出校门的学子而言，将是莫大的鼓励。这是一份简单而朴实的求职函，他的普通也许没深深地吸引您的目光，他也没摞摞的获奖证书作为我求职的筹码，但他蕴涵着一颗热情而赤诚的心，他渴望您的了解、支持和帮助，请允许我向您毛遂求职。
我是一名xx医学院xx级“临床医学”专业即将毕业的学生，名字叫做xxx。在校期间，主要系统学习了医用基础化学、组织胚胎学、系统解剖学、生理化学等基础学科和药理学、诊断学、内科学、外科学、妇科学、儿科学等专业学科，还选修了医学心理学、急诊学、医学创造学、文献检索、计算机基础及微机应用系统visulfoxpro等课程，进一步完善了知识结构，掌握了扎实的医学专业理论知识，为今后在医学领域工作中打下了坚实的基础。
大学生活并不是我们想象中的乐园，更不是我们理想中的天堂，而是一个锻炼人的大火炉。作为一个工人的儿子，血里流着工人的刻苦耐劳，也教了我坚韧不拔的处事准则和方法，家庭的贫困,父母的期望,社会的竞争是我学习的动力。在五年学习生活中，我不断完善自己，全面发展，以锐意进取和踏实诚信的表现,赢得了老师和同学的信任及赞誉。入校以来，我注重理论与实践相结合，不仅学好专业理论知识，而且积极参加各种实验技术操作，培养了较好的学习能力和提高了自身综合素质。
物识一个掌握扎实专业医学知识,并且有一定工作能力和组织能力的部下，是你的愿望;谋求一个充分发挥自己专业特长的工作单位，并能得到你的关照，是我的期望。我作为一个刚从象牙塔山出的大学生，年轻意味着欠缺经验，令你犹豫不决，但是年轻也意味着热情和活力，我相信凭着自己的能力和学识，本着虚心学习，积极进取，尽忠尽责作好本职工作的态度，一定能克服工作中的各种困难。请相信我的干劲与努力将弥补这暂时的不足，也许我不是的，但我绝对是最努力的。相信你在给我一个机会的同时，你也多一分选择，愿你的慧眼开启我人生的旅程。
再次感谢你留时间来阅读我的求职书，衷心祝愿你工作顺利，万事如意!同时诚恳希望得到贵医院的接约或面试机会，以进一步考查我的能力。谢谢!
此致
敬礼
求职人：xxx
xxxx年xx月xx日
对于临床医学实习出科心得体会如何写九
恶性黑色素瘤是一种高度恶性且侵袭性的癌之一，多发生于皮肤，早期发生血行转移。对放、化疗不敏感，在世界范围内发病率增高，人们一直在期待着可以征服恶性黑素瘤的新的疗法的出现！
最近大量的数据表明恶性肿瘤的发展与t—钙粘蛋白的表达变化相关、t—钙粘蛋白已在乳腺癌、前列腺癌、肝癌、肺癌[1—3] 、胃癌、胰腺癌、卵巢癌[4—9]等多种恶性肿瘤中被检测到表达减少、最近的研究表明t/h—钙粘蛋白在乳腺癌中的重新表达能抑制肿瘤细胞的生长，降低体外培养的肿瘤细胞的侵袭潜能[1]、t/h—钙粘蛋白这个新型钙粘蛋白分子在人类许多癌细胞中表达都降低表明它或许在肿瘤细胞的侵袭和转移[10]及维持正常细胞的表型中起重要作用[11]、t/h—钙粘蛋白与肿瘤的发生、发展有着密切的联系，也许它会为肿瘤的诊断和治疗带来新的契机、t—钙粘蛋白是否对恶性黑色素瘤也有作用，目前还没有相关研究的报道，所以本实验将进行相关方面的探讨性研究！
研究内容：
第一部分：正常表皮组织、痣细胞及黑色素瘤细胞中t—cadherin表达情况
第二部分t—cadherin基因克隆和真核表达载体的构建
第三部分：t—cadherin基因的真核表达及生物活性分析
创新点：首次将t—cadherin基因转染黑素瘤细胞
拟解决的关键问题：通过rt—pcr反应扩增出t—cadherin的基因全长。
预期成果及提供形式：
观察t—钙粘蛋白在正常皮肤组织细胞、痣细胞及黑色素瘤细胞中的表达情况！
进一步阐明t—钙粘蛋白作用机制
t—钙粘蛋白基因转染入黑色素瘤细胞后观察对其增殖和转移活性的抑制情况，探索临床诊断和治疗黑色素瘤及其它肿瘤的方法！
研究方法：
第一部分：正常表皮组织、痣细胞及黑色素瘤细胞中t—cadherin表达情况
免疫组织化学和免疫细胞化学
1、材料：从正常人皮肤切取的痣组织，人黑色素瘤细胞株
2、主要试剂和溶液
（1）第一抗体：兔抗人t—cadherin抗体
（2）第二抗体：生物素标记羊抗兔igg
（3）“三抗”：链亲和霉素标记hrp
3、设备
4、方法
（1）冷冻切片的免疫染色程序
（2）活细胞的免疫染色程序
5、荧光显微镜检
注意：为保证结果的可靠性应该同时设有对照
阳性对照（正常组织）；
阴性对照（pbs代替一抗）以证明抗体的特异性。
第二部分t—cadherin基因克隆和真核表达载体的构建
1、材料：
（1）组织和细胞
（2）菌株与质粒
（3）工具酶
（4）试剂
（5）仪器
2、方法
（1）引物的设计
（2）总rna的提取：异硫氰酸胍—酚—氯仿抽提一步法
（3）甲醛变性琼脂糖凝胶电泳分析其质量，观察所提rna有无明显降解；
（4）逆转录rt反应：为了证实rt反应的成功设管家基因gapdh为内对照
（5）pcr扩增：利用上下游引物，在dna聚合酶下对目的片段进行扩增，pcr过程设β—actin为内对照
（6）pcr产物的回收、纯化
（7）pcr产物的克隆
（8）dna序列测定
（9）真核重组表达质粒的构建
（10）阳性重组质粒的鉴定和筛选
（11）质粒的大量提取
（12）转染黑色素瘤细胞
第三部分：t—钙粘蛋白基因的真核表达及生物活性分析
1、材料
2、方法
（1）转染细胞的培养
（2）western印迹法检测转染后蛋白的表达
（3）流式细胞周期分析
（4）凋亡的检测
技术路线图：
研究进度安排：
20xx、9——20xx、7学习学位课程，查阅文献，完成课题设计
20xx、9——20xx、9基本完成实验研究工作
20xx、10——20xx、3完成实验补遗工作并进行统计分析，撰写论文
20xx、4——20xx、6论文答辩
试剂费用：15000元
组织及细胞：1000元
文献资料费：500元
论文打印费：1000元
答辩费：1500元
总计：19000元
实验在导师的指导下进行，导师段昕所教授、主任医师对黑色素瘤的诊断治疗、检测方法和研究进展有深入的了解，对本课题的研究设计及实验有重要的指导意义。
已完成黑色素瘤及t—钙粘蛋白研究最新进展的文献检索和综述报告工作。
所有实验均在承德医学院附属医院皮肤病研究室和中心实验室完成。实验室的老师实验技术熟练，在细胞培养、免疫组化及分子生物学等方面都可给予指导；实验所需的科研仪器设备实验室均具备。
参考文献：
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